Filoresenti maikrosikopiki: agbekale ti awọn ọna

Gbigba ki o si tun-njade lara ti ina siwaju ẹya ara ki o si Organic fifa ni abajade ti phosphorescence tabi filoresenti. Awọn iyato laarin awọn iyalenu ni iye ti awọn aarin laarin gbigba ati njade lara ti ina ṣiṣan. Nigba ti o ti filoresenti ti awọn wọnyi lakọkọ waye fere ni nigbakannaa, nigba ti phosphorescence - pẹlu awọn idaduro.

itan alaye

Ni 1852, British sayensi Stokes, akọkọ ṣàpèjúwe filoresenti. O si ṣe titun kan oro bi kan abajade ti awọn adanwo pẹlu fluorspar, eyi ti emit pupa ina labẹ ultraviolet ina. Stokes woye ohun awon lasan. O ti wa ni ri wipe wefulenti ti awọn Fuluorisenti Ìtọjú jẹ nigbagbogbo tobi ju awọn sisan ti awọn inudidun ina.

Lati jẹrisi ilewq ninu awọn 19th orundun nibẹ ti ti ọpọlọpọ awọn adanwo. Nwọn si fihan wipe a orisirisi ti awọn ayẹwo fluoresce labẹ awọn ipa ti ultraviolet ina. Lara awọn ohun elo, ninu ohun miiran, ti kirisita, resins, ohun alumọni, chlorophyll, robi oloro, ẹya ara agbo, vitamin, epo. Awọn taara lilo ti dyes fun ibi igbeyewo bẹrẹ nikan ni 1930

Filoresenti maikrosikopiki: apejuwe

Diẹ ninu awọn ti awọn ohun elo ti a lo ninu akọkọ idaji awọn 20 orundun ẹrọ towo ga pato. стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. O ṣeun si awọn iṣẹ, eyi ti o le wa ko le waye nipa contrasting ọna, awọn ọna ti filoresenti maikrosikopiki ti di ohun awọn ibaraẹnisọrọ ọpa ni ìwádí ati ti ibi iwadi. Se pataki esi won gba, ati fun ohun elo.

? Ohun anfani wo ni ọna ti filoresenti maikrosikopiki? Lilo titun ohun elo ti di ti ṣee ati awọn asayan ti nyara kan pato cell submicroscopic irinše. Filoresenti maikrosikopiki le ri nikan ohun ti. A orisirisi ti dyes gba awọn ti idanimọ ọpọ ohun ni ẹẹkan. Pelu awọn lopin aye ti o ga ti awọn tite imole iye ti awọn ẹrọ, eyi ti, ni Tan, da lori awọn kan pato-ini ti awọn ayẹwo, awọn ti idanimọ ohun ni isalẹ yi ipele jẹ tun oyimbo ṣee ṣe. Orisirisi awọn ayẹwo lẹhin ti itanna han autofluorescence. Yi lasan ti wa ni o gbajumo ni lilo ninu petrology, Botany, awọn semikondokito ile ise.

Awọn ẹya ara ẹrọ

Iwadi eranko tissues tabi pathogens igba idiju tabi ko lagbara tabi gan lagbara unspecific autofluorescence. Sibẹsibẹ, awọn iye ni ẹrọ acquires ifihan sinu awọn ohun elo ti irinše yiya ni kan pato wefulenti ati emitting awọn pataki ina sisan kikankikan. Fluorochromes sise bi dyes ti o lagbara ti ominira so si ẹya (han tabi alaihan). Bayi ni won ni a ga selectivity si awọn afojusun, ati awọn kuatomu ikore.

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. Filoresenti maikrosikopiki ti a ti o gbajumo ni lilo niwon awọn dide ti adayeba ki o si sintetiki dyes. Nwọn si gbà awọn kikankikan profaili ti awọn njade lara ati inudidun ati ìfọkànsí si kan pato ibi fojusi.

Identification ti olukuluku ohun ti

Igba, ni bojumu ipo, o le forukọsilẹ kan lọtọ ano alábá. Fun eyi, laarin awọn ohun miiran, o jẹ pataki lati pese kan to kekere ariwo ti awọn oluwari ati awọn opitika lẹhin. Fluorescein moleku to ikuna nitori photobleaching le emit soke si 300 ẹgbẹrun. Photons. Ni 20% gbigba ṣiṣe ti awọn ilana ati ki o le forukọsilẹ wọn ni ohun iye ti nipa 60 ẹgbẹrun.

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. Filoresenti maikrosikopiki da lori owusuwusu photodiodes tabi ẹrọ itanna isodipupo, laaye awọn oluwadi lati mo daju ni ihuwasi ti olukuluku ohun ti nipasẹ awọn keji, ati ninu awọn igba ani iṣẹju.

complexity

A bọtini oro ni ojurere ti awọn bomole ti opitika ariwo lẹhin. Nitori si ni otitọ wipe ọpọlọpọ awọn ti awọn ohun elo ti a lo ninu awọn oniru ti Ajọ ati tojú fi han diẹ ninu awọn autofluorescence, awọn akitiyan ti sayensi ni ibẹrẹ ipo won Oorun si isejade ti irinše nini a kekere filoresenti. Sibẹsibẹ, ọwọ adanwo ti yori si titun ipinnu. , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. Ni pato, o ti ri pe filoresenti maikrosikopiki, da lori lapapọ ti abẹnu otito, o gba lati se aseyori kan kekere isale ati ki o ga kikankikan inudidun ina.

siseto

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. Awọn agbekale ti filoresenti maikrosikopiki, da lori lapapọ ti abẹnu otito ni awọn lilo ti evanescent igbi tabi evanescent. Ti o ba waye ni ala laarin awọn media pẹlu o yatọ si refractive iwon. Ninu apere yi, awọn ina tan ina koja nipasẹ awọn prism. O ni o ni kan to ga refractive Ìwé paramita.

Awọn prism nitosi si olomi ojutu tabi gilasi pẹlu kekere paramita. Ti o ba ti a tan ina ti ina directed ni o ni igun kan ti o jẹ diẹ lominu ni, tan ina ti wa ni mo ṣe àyẹwò lati ni wiwo. Yi lasan, ni Tan, fa nonpropagating igbi. Ni gbolohun miran, awọn ti ipilẹṣẹ ti itanna oko ti si abẹ sinu kan alabọde pẹlu kan kekere refractive Ìwé paramita to kan ijinna kere ju 200 nanometers.

Awọn evanescent igbi kikankikan ti awọn ina ni yio jẹ to lati ṣojulọyin fluorophores. Sibẹsibẹ, nitori ti awọn oniwe lalailopinpin kekere ijinle, awọn oniwe-iwọn didun yoo jẹ gidigidi kekere. Awọn esi ni a kekere-ipele lẹhin.

iyipada

Filoresenti maikrosikopiki wa ni da lori lapapọ ti abẹnu otito, le ti wa ni muse pẹlu epi-itanna. Eleyi nilo tojú pẹlu ga ìtúwò iho (o kere 1,4, sugbon o jẹ wuni wipe o ami 1.45-1.6), ati sile itana oko ohun elo. Awọn igbehin ti wa ni waye pẹlu kan kekere awọn iranran iwọn. Fun tobi uniformity lilo kan tinrin oruka, eyi ti o ti dina nipa a ìka ti awọn odò. Fun awọn lominu ni igun, lẹhin eyi ti o wa ni a lapapọ otito, a nilo kan to ga ipele ti refraction ti awọn immersion alabọde ninu awọn lẹnsi ati awọn ideri gilasi ti awọn maikirosikopu.